紫外凝膠成像儀是一種用于分子生物學(xué)實驗中對DNA或RNA進(jìn)行切膠、拍照、觀察和分析的實驗室儀器。它主要由CCD相機、暗室和分析軟件等部分組成,能夠提供白光和紫外光以及藍(lán)光光源進(jìn)行拍攝,并通過內(nèi)置的圖像捕捉及分析軟件對圖像進(jìn)行處理。
1.開機前準(zhǔn)備
檢查電源與數(shù)據(jù)線連接:確保儀器的電源線與數(shù)據(jù)線已正確連接,并確認(rèn)儀器處于關(guān)閉狀態(tài)。
開啟電源:首先打開儀器的電源開關(guān),然后打開電腦,進(jìn)入系統(tǒng)界面。
2.啟動軟件
進(jìn)入操作界面:雙擊電腦桌面上的“QuantityOne”軟件快捷方式,進(jìn)入軟件操作界面。
3.準(zhǔn)備樣本
放置凝膠:將待觀測的凝膠小心放置在觀測臺上,避免產(chǎn)生氣泡,以免影響觀測結(jié)果。
4.選擇光源與濾光片
光源選擇:根據(jù)需要選擇透射紫外光、側(cè)面(反射)白光等光源模式。
濾光片調(diào)整:如果需要進(jìn)行核酸類物質(zhì)的紫外光觀測分析,應(yīng)將濾光片撥至CCD鏡頭前。
5.圖像采集
對焦與調(diào)節(jié):在軟件中選擇“live/Focus”模式,通過調(diào)節(jié)光圈大小、聚焦遠(yuǎn)近及圖像大小,優(yōu)化圖像質(zhì)量。
采集圖像:根據(jù)需要選擇自動或手動模式獲取圖像。
6.圖像保存與分析
保存圖像:完成圖像采集后,點擊“SAVE”鍵保存。如果需要導(dǎo)出為其他格式,如JPEG/TIFF,可在“FILE”菜單下選擇相應(yīng)導(dǎo)出選項。
圖像分析:保存的圖像可直接在軟件中進(jìn)行分析,或保存后稍后分析。
此外,在了解紫外凝膠成像儀是操作流程的同時,還需要注意以下幾點:
1.在使用過程中,切勿打開凝膠成像系統(tǒng)的前面板,以防止紫外線污染。
2.照相完畢后,應(yīng)及時使用較軟的紙擦拭干凈遺留在觀測板上的水或液體。
3.調(diào)焦過程中動作要輕柔,以免影響儀器性能。
4.若圖像上出現(xiàn)高亮紅點,說明曝光過度,此時需要縮小光圈。
5.觀測結(jié)束后,及時關(guān)閉光源以延長燈管使用壽命。
6.盡可能不要將電腦連接到互聯(lián)網(wǎng)或局域網(wǎng),并在電腦上安裝殺毒軟件,以保證數(shù)據(jù)安全。