紫外凝膠成像儀是一種實驗室設備,主要用于生物醫(yī)學和醫(yī)藥領域,對蛋白質和核酸凝膠進行成像和分析。它提供的功能包括分子量定量、密度定量、密度掃描、PCR定量等。具體介紹如下:
1.分子量定量:通過對DNAMarker條帶的已知分子量進行注釋,自動生成擬合曲線,進而準確衡量未知條帶的分子量。
2.密度定量:在測定DNA和RNA濃度時,先對標準條帶進行密度標定,然后比較未知條帶的密度,從而得到其含量。
3.密度掃描:用于計算蛋白表達產物在菌體蛋白中的百分比含量,較傳統方法更簡便。
4.PCR定量:計算PCR實驗擴增出來的不同條帶相對于總體條帶的百分數。
紫外凝膠成像儀的正確使用過程包括準備階段、操作步驟和圖像獲取與分析等。具體介紹如下: 1.準備階段
工作環(huán)境要求:儀器應放置在室溫15-30℃,相對濕度不大于80%的環(huán)境中工作。工作臺應平坦、牢固,無振動或其他影響儀器正常工作的現象。
樣品準備:將電泳后的瓊脂糖凝膠置于拍攝面板上。確保凝膠沒有氣泡,位置正確。
2.操作步驟
開機:先打開凝膠成像系統,再開電腦并進入軟件。
放置凝膠并調整參數:把電泳后的凝膠樣品放在紫外凝膠成像儀上,設置成像參數如波長、照度和曝光時間等。
拍攝圖像:打開UV1鍵,進行自動預覽及捕獲圖像,點擊拍照鍵完成拍攝。
3.圖像獲取與分析
啟動成像程序:記錄圖像后,可利用系統自帶的圖像捕捉和分析軟件對拍攝的圖像進行處理和分析。
圖像處理:通過軟件對圖像進行剪輯、標記,自動尋找凝膠條帶,并與標準條帶比較計算分子量或密度。
數據輸出:詳細的分析結果可以輸出成Excel格式,便于進一步編輯和分析。
4.維護保養(yǎng)
清潔:定期清理儀器表面和拍照面板,保持紫外燈箱及投影白光板的清潔。
檢查:每次使用后檢查數據線連接是否正常,軟件功能是否完好。
注意事項:避免用力推動關閉暗箱門,以保護機械結構。
5.使用注意事項
防止污染:不要用被污染的手套接觸凝膠成像系統的部件,避免EB污染。
光源使用:在使用紫外光源期間,切勿打開凝膠成像儀的前面板,以防紫外線傷害。
穩(wěn)壓電源:使用穩(wěn)壓電源,確保儀器穩(wěn)定運行。